توضیحات
محیط Lauryl Sulfate Broth عمدتاً به عنوان محیط غنیسازی انتخابی برای تشخیص باکتریهای کلیفرم (Coliforms) استفاده میشود:
-
تشخیص غیربهداشتی و آلودگی میکروبی در آب، پسابها، محیط زیست
-
استفاده در صنایع غذایی و آشامیدنی برای کنترل کیفیت میکروبی
-
استفاده در روشهای استاندارد بینالمللی برای شمارش تخمین باکتریهای کلیفرم (مُدول احتمالی)
-
در تحقیقات آزمایشگاهی که نیاز به تفکیک کلیفرمها از سایر میکروارگانیسمهاست
مزیت این محیط این است که لوریل سولفات به عنوان عامل انتخابی، رشد میکروارگانیسمهای ناخواسته را مهار میکند و اجازه میدهد تمرکز بر رشد کلیفرمها باشد.
فرمول تقریبی / ترکیب (مطابق منابع)
طبق منابع مرتبط با Lauryl Tryptose Broth (شباهت زیاد به Lauryl Sulfate Broth):
| ماده | میزان (گرم در لیتر) |
|---|---|
| Tryptose | 20.0 g |
| لاکتوز (Lactose) | 5.0 g |
| NaCl | 5.0 g |
| لوریل سولفات (Sodium Lauryl Sulfate) | 0.1 g |
| K₂HPO₄ | 2.75 g |
| KH₂PO₄ | 2.75 g |
با این ترکیب، محیط اجازه میدهد حتی باکتریهای “لاکتوز کند” (slow lactose-fermenting) نیز رشد کنند و تولید گاز نمایند.
روش آمادهسازی و کاربرد آزمایشی
در ادامه روش کلی آمادهسازی و استفاده محیط:
-
وزنکردن پودر: برای ۱ لیتر محیط، تقریباً 35.5 گرم پودر را وزن کن (مقداری که طبق دستور سازنده داده شده است).
-
حل کردن: پودر را در حجم مناسب آب مقطر حل کن (به آرامی هم بزن تا کامل حل شود).
-
پایدارسازی (Buffer): ترکیب شامل فسفاتها به عنوان بافر برای ثابت نگهداشتن pH است.
-
توزیع در لولهها: اگر از لولههای دورهام (Durham tubes) استفاده میکنی، ۱۰ میلیلیتر در هر لوله بریز.
-
استریلسازی: لولهها یا ظروف حاوی محیط را در دمای 121 °C به مدت تقریباً 15 دقیقه اتوکلاو کن.
-
خنک کردن: اجازه بده محیط به دمای مناسب (حدود 35-37 °C) برسد.
-
لقاح نمونه: نمونه مورد بررسی را به محیط وارد کن.
-
انکوباسیون: معمولاً در دمای 30 ±۱ °C یا 35–37 °C به مدت 24 تا 48 ساعت.
-
تفسیر نتایج:
-
اگر تولید گاز در لوله دورهام رخ دهد، نشانه رشد کلیفرم است (نتیجه مثبت).
-
اگر رشد بدون گاز یا عدم رشد مشاهده شود، نتیجه منفی فرض میشود.
-
در برخی پروتکلها، لولههای مثبت برای تأیید به محیطهای دیگری مانند Brilliant Green Lactose Bile Broth منتقل میشوند.
-
نکات کیفیت کنترل و مجوزها
-
تست رشد (Growth Promotion Test) بر روی سویههای مرجع مانند Escherichia coli ATCC 25922، E. coli ATCC 8739 و Citrobacter freundii ATCC 43864 انجام میشود.
-
در تست کیفیت، باید رشد مثبت این سویهها مشاهده شود.
-
همچنین برخی سویههای کنترل مانند Enterococcus faecalis نباید در این محیط رشد کنند یا تولید گاز کنند.
نکات ایمنی و نگهداری
-
محصول را در محیط خشک و محکم بسته در دمای بین +15 تا +25 °C نگهداری کنید.
-
هنگام کار با پودر باید از تجهیزات ایمنی مانند دستکش، عینک محافظ و ماسک مناسب استفاده کنید تا استنشاق گرد و غبار جلوگیری شود.
-
باقیمانده محیط یا ظروف مصرفشده را مطابق مقررات زیستمحیطی دفع کن (نباید به فاضلاب عادی بیفتد).
-
در صورت تماس با پوست یا چشم، با آب فراوان شستوشو بده و در صورت لزوم به پزشک مراجعه کن.
-
از قرار دادن محصول در معرض رطوبت یا دمای بالا خودداری کن.
نقد و بررسیها
هنوز بررسیای ثبت نشده است.